器材和试剂
洗涤缓冲液
结合缓冲液
辣根过氧化物酶(HRP)连接的抗M13单克隆抗体(mAb) (Amersham Biosciences)
HRP底物㈠OPD(邻苯二胺,o-phe-nylenediamine) (Sigma)或ATBS 【2,2-连氮基-双-(3-乙基苯并噻吡咯啉-6-磺 酸),2,2’-azinobis(3-ethylbenzothiazo-line-6-sulfonic acid)】 (Kinkegaard和Perry)
预先准备的噬菌体包被的微孔板
方 法
1,每块板用洗涤缓冲液洗涤3次。
2.用结合缓冲液将HRP联结的抗M13单克隆抗体做1:5000稀释,每孔加入100ul,室 温下孵育30分钟。
3.每块板用洗涤缓冲液洗涤3次。
4.每孔加入lOOglOPD显色,不超过15分钟后用50ul 2.5mol/L的HzS04终止反应。
5.检测每块板在492nm处的吸光度。