胶体金与蛋白质的结合成功与否，取决于pH值，一般只有在蛋白质等电点(pI)略偏碱的条件下，二者才能牢固地结合，因此，标记之前须将胶体金溶液的pH值调至标记蛋白质的等电点略偏碱。一般可用0．1mol/LK2CO3或0．1mol/L HCl调高或调低pH值。由于金溶胶会损害pH计探头，故采用pH试纸测定pH值。几种常用的蛋白质标记时，胶体金所用pH值见表。
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胶体金合成中各种蛋白、酶的等电点
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│ 蛋白 │ pH │ 蛋白 │ pH │
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│ IgG │ 9．0 │ DNA酶 │ 6．0 │
│ F(ab)2 │ 7．2 │ RNA酶 │ 9．0～9．2│
│ McAb │ 8．2 │ 低密度脂蛋白 │ 5．5 │
│ SPA │ 5.7～6．2 │ 亲和素 │ 10~10．6 │
│ HRP │ 7．2～8．0│ 链霉亲和素 │ 6．4～6．8│
│ BSA │ 5．2～5．5│ 凝集素(Lectin)I│ 8．0 │
│ 胰岛素—BSA结合物 │ O．d │ α—球蛋白 │ 6．0 │
│ 亲和层析IgG │ 7．6 │ 霍乱毒素 │ 6．9 │
│ 大豆凝集素 │ 6．1 │ 破伤风毒素 │ 6．9 │
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